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國產(chǎn)PCR儀購買時的注意事項

國產(chǎn)PCR儀購買時的注意事項PCR儀作為分子生物學(xué)相關(guān)實驗的常規(guī)儀器，每年都有數(shù)千臺的選購量，這兩年一批國產(chǎn)PCR儀正在興起。購買國產(chǎn)PCR儀需要考慮以下因素1樣本管的種類現(xiàn)在主要有0.2ml和0.5ml兩種，使用0.5mlPCR管的人員已經(jīng)很少了，一是0.5mlPCR專用的薄壁管很少見，二是如果想要較大體積的PCR產(chǎn)物，可以通過多分幾個0.2mlPCR管來實現(xiàn)。除非經(jīng)常需要較大體積的PCR產(chǎn)物，否則可以不必考慮0.5ml型的PCR儀。2樣本容量種類很多，0.2ml的有96孔...

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瓊脂糖凝膠電泳時注意事項

瓊脂糖凝膠電泳分子生物學(xué)常用的實驗方法，那么在凝膠電泳過程中需要注意哪些事項呢？一、切膠時的注意事項1.盡量保證電泳的buffer和gel都是新制的，切膠的臺子清理干凈，刀片也要洗凈，確保切下的沒有外源dna污染。2.為了減少膠的體積，可以用相對比較薄的膠來做，只要夠點樣即可，也可采用薄而寬的梳子來跑膠。3.關(guān)于防護(hù)，戴一般有機(jī)玻璃眼罩就足夠了，戴上防護(hù)面具也以保護(hù)眼睛，如果戴樹脂眼鏡就可以了。要是非常害怕紫外照射，或者對于膠有特殊要求，例如要求不含EB，可以采用點marke...

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HEK293細(xì)胞的特點與應(yīng)用

HEK293細(xì)胞的特點和應(yīng)用人胚腎293(HEK293)細(xì)胞是生物技術(shù)和研究中常用的細(xì)胞系之一。由于HEK293細(xì)胞具有較高的生長效率，通常生成用于生物醫(yī)學(xué)和藥物研究的外源性蛋白質(zhì)。HEK293細(xì)胞也會被用于各種轉(zhuǎn)染實驗中。HEK293細(xì)胞起源和背景人胚腎293細(xì)胞AlexVanderEb在1970年代時培養(yǎng)出了HEK293細(xì)胞系。為了產(chǎn)生永生化細(xì)胞系，Graham將5型腺病毒的DNA轉(zhuǎn)染到HEK細(xì)胞的人類19號染色體中。Ad5整合到細(xì)胞基因組中導(dǎo)致細(xì)胞凋亡的預(yù)防，從而導(dǎo)致細(xì)...

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購買細(xì)胞常見問題匯總

購買細(xì)胞常見問題匯總購買細(xì)胞收到細(xì)胞前，應(yīng)做哪些準(zhǔn)備工作？購買細(xì)胞應(yīng)具有一定細(xì)胞培養(yǎng)知識與經(jīng)驗，并具備基本實驗設(shè)備，如細(xì)胞培養(yǎng)實驗室、超凈工作臺、CO2培養(yǎng)箱，倒置顯微鏡等；還應(yīng)準(zhǔn)備好相應(yīng)的細(xì)胞無菌培養(yǎng)基、血清、雙抗、細(xì)胞培養(yǎng)瓶、培養(yǎng)板、移液管等。購買的細(xì)胞收到細(xì)胞后，應(yīng)該怎么操作？1.觀察細(xì)胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有，請及時與技術(shù)支持聯(lián)系；2.用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運輸問題，部分貼壁細(xì)胞會有少量從瓶壁脫落，將細(xì)胞置于細(xì)胞培...

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降低CHO細(xì)胞培養(yǎng)中的乳酸水平的解決方案

乳酸是CHO細(xì)胞補料分批培養(yǎng)的主要副產(chǎn)品之一。在pH控制的生物反應(yīng)器中，由于添加堿以控制細(xì)胞培養(yǎng)基的pH值，高水平乳酸的積累伴隨著高滲透壓，可能導(dǎo)致制造細(xì)胞生長緩慢，甚至大量凋亡，同時產(chǎn)生抗體蛋白的產(chǎn)量也降低不少。而乳酸脫氫酶(LDH)是一種催化底物丙酮酸轉(zhuǎn)化為乳酸的酶，包括丙酮酸濃度在內(nèi)的許多因素都會調(diào)節(jié)LDH活性。乳酸脫氫酶對代謝產(chǎn)物的影響在一項研究中，科學(xué)家們曾嘗試敲低乳酸脫氫酶A(LDHa)和PDHK的基因表達(dá)，以研究對乳酸代謝和蛋白質(zhì)生產(chǎn)的影響。他們發(fā)現(xiàn)，使用攜帶L...

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