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生物實(shí)驗(yàn)室操作技術(shù)規(guī)范

病原微生物實(shí)驗(yàn)操作規(guī)范病原微生物接種的操作規(guī)范：做到以下4點(diǎn)能較大限度地減少接種時(shí)氣溶膠的產(chǎn)生。1.打開菌種管時(shí)，將安瓿管頸部燒熱，用冷的濕棉球使之突然破裂，才可以大大減小溶膠的產(chǎn)生。2.劃板時(shí)，瓊脂平板要選用表面光滑的；接種環(huán)應(yīng)用彈性小的金屬絲制作，絲桿要短，環(huán)不宜過大，劃板動(dòng)作要輕。3.接完種后，蘸有菌液的接種環(huán)應(yīng)在含有消毒液的毛巾上吸干后再放到火焰上灼燒到紅。4.混勻微生物懸液的時(shí)候，旋轉(zhuǎn)式搖動(dòng)，不能左右搖動(dòng)；搖動(dòng)時(shí)動(dòng)作輕柔不要使懸液弄濕試管塞。生物樣本移液操作規(guī)范生物...

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生命科學(xué)研究中常用的幾種實(shí)驗(yàn)方法

生命科學(xué)研究時(shí)生物學(xué)的分支，下面介紹幾個(gè)關(guān)于生命科學(xué)常用的幾種實(shí)驗(yàn)方法：一、BCA法測(cè)蛋白質(zhì)濃度實(shí)驗(yàn)原理：BCA(bicinchoninicacid，二辛可酸)法測(cè)定蛋白質(zhì)即在堿性條件下蛋白質(zhì)與Cu2+絡(luò)合，并將其還原成Cu1+。Cu1+和BCA試劑反應(yīng)使其由原來的蘋果綠形成穩(wěn)定的紫藍(lán)色復(fù)合物，在562nm有強(qiáng)烈的光吸收，且吸光值和蛋白質(zhì)濃度在廣泛范圍內(nèi)有良好的線性關(guān)系，因此可用于蛋白質(zhì)濃度測(cè)定。二、免疫組化原理:免疫組織化學(xué)，即免疫組化，是應(yīng)用免疫學(xué)基本原理一-抗原抗體反應(yīng)...

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實(shí)時(shí)熒光定量 PCR技術(shù)

實(shí)時(shí)熒光定量PCR，簡(jiǎn)稱RT-QPCR,屬于Q-PCR的一種，目前該技術(shù)已得到廣泛應(yīng)用，如：擴(kuò)增特異性分析、基因定量分析、基因分型、SNP分析等。熒光定量PCR常用的方法是DNA結(jié)合染料SYBRGreenⅠ的非特異性方法和Taqman水解探針的特異性方法。SYBRGreenI是一種結(jié)合于所有dsDNA雙螺旋小溝區(qū)域的具有綠色激發(fā)波長(zhǎng)的熒光染料，可與所有的各種序列的雙鏈DNA分子結(jié)合。在游離狀態(tài)下，SYBRGreenI發(fā)出微弱的熒光，但一旦與雙鏈DNA結(jié)合，嵌入至dsDNA，熒...

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如何選擇合適的細(xì)胞凋亡試劑盒

細(xì)胞調(diào)亡是細(xì)胞主動(dòng)死亡的過程，并出現(xiàn)一系列特征變化。包括核固縮、核碎裂、凋亡小體形成，以及DNA特征性片段化、新的基因表達(dá)和特定的生物大分子合成等。流式細(xì)胞儀可以對(duì)不同細(xì)胞凋亡的過程進(jìn)行定性和定量檢測(cè)，通過檢測(cè)細(xì)胞膜完整性來反應(yīng)細(xì)胞凋亡是常用的流式檢測(cè)細(xì)胞凋亡常用方法之一。其原理是：①用AnnexinV檢測(cè)早期凋亡細(xì)胞：AnnexinV可以結(jié)合細(xì)胞膜上的磷酯酰絲氨酸，磷酯酰絲氨酸位于正常細(xì)胞膜內(nèi)側(cè)，不會(huì)被檢測(cè)到，凋亡時(shí)外翻到細(xì)胞膜外表面，可以被檢測(cè)到。②用PI或者7AAD檢測(cè)...

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CCK-8法進(jìn)行細(xì)胞毒性檢測(cè)的方法

CCK-8法進(jìn)行細(xì)胞毒性檢測(cè)的方法CCK-8法是細(xì)胞活力和細(xì)胞毒性檢測(cè)常用的一種檢測(cè)方法，其具體操作方法如下：1.制備細(xì)胞懸液：選取生長(zhǎng)狀態(tài)良好的對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期細(xì)胞制作細(xì)胞懸液，并計(jì)數(shù)。2.在96孔板中接種細(xì)胞懸液(100μL/孔)。3.將培養(yǎng)板置于培養(yǎng)箱中預(yù)培養(yǎng)（37℃，5%CO2）12-24小時(shí)，使細(xì)胞達(dá)到指數(shù)期（培養(yǎng)時(shí)間根據(jù)細(xì)胞種類的不同和每孔內(nèi)細(xì)胞數(shù)量的多少而異）。4.吸出各孔培養(yǎng)基，向培養(yǎng)板加入10μL不同濃度的待測(cè)藥物進(jìn)行干預(yù)。（實(shí)驗(yàn)組加入含不同濃度藥物的培養(yǎng)基，空白...

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