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免疫測(cè)定(IA)是極其重要的生物分析方法,免疫測(cè)定的原理及免疫測(cè)定方法用于量化溶液中從小分子到大分子的分析物(血清、毒素、激素等),使用抗體或抗原作為生物識(shí)別劑。通常應(yīng)用于廣泛的科學(xué)學(xué)科,包括生物制藥分析、臨床診斷、環(huán)境監(jiān)測(cè)和食品檢測(cè)。酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)1917年,奧地利生物學(xué)家卡爾·蘭德施泰納(KarlLandsteiner)開發(fā)了分析具有抗原特性的小分子的方法。他的方法成為發(fā)展免疫分析的框架。從1995年到2017年,科學(xué)家們開發(fā)了廣泛的免疫測(cè)定法,可以對(duì)生物樣品進(jìn)行定性和...
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納米抗體是在重鏈上具有單個(gè)可變結(jié)構(gòu)域的抗體,也稱為VHH抗體。納米抗體通常被視為傳統(tǒng)抗體的替代品,并且在影響其適用的生產(chǎn)和使用方面存在顯著差異。什么是納米抗體?納米抗體和傳統(tǒng)抗體之間的主要區(qū)別在于它們的結(jié)構(gòu)和域。常規(guī)抗體具有VH和VL兩個(gè)可變域,它們相互支撐形成抗體結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定。納米抗體具有VHH結(jié)構(gòu)域并缺少VL結(jié)構(gòu)域,但仍然高度穩(wěn)定。缺少VL域也意味著納米抗體具有親水的一面。憑借眾多優(yōu)勢(shì),納米抗體的應(yīng)用非常多樣化。它們由天然存在于駱駝科動(dòng)物和鯊魚中的重鏈抗體制成,自25年前發(fā)...
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滴定管和移液器是實(shí)驗(yàn)室常用的小實(shí)驗(yàn)工具,那么二者有什么區(qū)別呢?移液器與滴定管的結(jié)構(gòu)不同盡管實(shí)驗(yàn)室分析人員使用滴定管和移液管工具對(duì)流體進(jìn)行準(zhǔn)確測(cè)量,但它們的用途不同。滴定管通常是固定的設(shè)備,而移液管是可移動(dòng)的。移液器既可以吸取也可以輸送液體,而滴定管只能輸送液體。通常,分析人員從頂部填充滴定管,而移液器從底部向上填充。這兩種設(shè)備都有刻度,可以測(cè)量準(zhǔn)確的流體體積,但移液器往往比滴定管更適合更小的體積。移液器是手持設(shè)備,通常比滴定管小。移液器和微量移液器是用于測(cè)量和分配精確液體量的...
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抗原修復(fù)技術(shù)主要用于增強(qiáng)免疫組織化學(xué)檢測(cè)中的信號(hào)。下面介紹一下抗原修復(fù)方法和修復(fù)技巧。一、抗原修復(fù)方法固定是在免疫組織化學(xué)過程中進(jìn)行的一個(gè)關(guān)鍵步驟,以保持組織形態(tài)。然而,這種方法也可能對(duì)免疫組織化學(xué)產(chǎn)生不利影響,因?yàn)樗?jīng)常改變蛋白質(zhì)生物化學(xué)并掩蓋感興趣蛋白質(zhì)的表位。因此,一抗無法與蛋白質(zhì)結(jié)合,導(dǎo)致信號(hào)強(qiáng)度低。這種掩蔽效應(yīng)可能是由表位中氨基酸的交聯(lián)或無關(guān)但存在于表位附近的肽的交聯(lián)引起的。這會(huì)改變抗原的構(gòu)象或靜電荷。在抗原修復(fù)過程中,這種掩蔽被逆轉(zhuǎn),從而可能發(fā)生抗原與表位之間的結(jié)...
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標(biāo)簽:免疫印跡蛋白質(zhì)科普抗體蛋白質(zhì)免疫印跡蛋白質(zhì)免疫印跡是檢測(cè)復(fù)雜混合物中蛋白質(zhì)抗原的常用技術(shù)。通過SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳分離樣品,然后將分離的蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)移到膜上。這些膜與特定于目標(biāo)蛋白質(zhì)的抗體一起孵育,該抗體與固定在膜上的蛋白質(zhì)條帶結(jié)合。然后使用檢測(cè)系統(tǒng)對(duì)抗體進(jìn)行可視化,該系統(tǒng)通?;谂cIg鏈結(jié)合的二級(jí)蛋白質(zhì),該蛋白質(zhì)與顯色反應(yīng)相關(guān)。與理論預(yù)測(cè)相反,檢測(cè)到幾個(gè)波段的情況并不少見。雖然抗體可能并不*針對(duì)蛋白質(zhì),但其他因素可能是原因:1.抗原的蛋白水解分解。這種情況并不少見,...
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