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CRISPR/Cas9 基因編輯和NGS驗證

CRISPR/Cas9基因編輯技術需要通過下一代測序(NGS)來驗證，能夠在核苷酸水平分辨率下進行大規(guī)模評估基因編輯的準確性和可靠性。高效、可自動化和可擴展的CIRCLE-seq是一種體外NGS測定，可以對CRISPR介導的切割進行靈敏的脫靶檢測。CRISPR/Cas9基因編輯技術CRISPR代表成簇規(guī)律間隔的短回文重復序列。這些重復的DNA片段最初來源于病毒病原體，并作為模板將CRISPR相關蛋白9(Cas9)核酸內切酶引導至新入侵的病毒。當Cas9遇到同源病毒序列時，它會...

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HE染色實驗中常見問題及應對措施

HE染色實驗常見問題及解決方案HE染色是石蠟切片技術中常用的染色方法之一，簡稱為蘇木精-伊紅染色法。該方法使用堿性的蘇木精染液將細胞核內的染色質和胞質內的核酸染成紫藍色，同時使用酸性染料伊紅將細胞質和細胞外基質中的成分染成紅色。1、切片出現(xiàn)白色斑點原因：(1)烘片溫度過低，導致玻片未干透；(2)切片在二甲苯中停留時間過短；(3)二甲苯使用時間過長，導致脫蠟不效果不好。對策：若玻片未干透，先用無水乙醇去除水分，再重新脫蠟。若斑點是由于停留時間過短或使用時間過長造成的，則需重新操...

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穩(wěn)定細胞株的篩選步驟

穩(wěn)定細胞株是一種常用于基因表達、藥物篩選和蛋白質表達等領域的工具。但是，穩(wěn)定細胞株的篩選需要經(jīng)過一系列的步驟和實驗，下面介紹一下穩(wěn)定細胞株篩選的兩種方法和穩(wěn)定細胞株的篩選簡要步驟：一、質粒轉染法先把質粒整合到染色體上后，用相應的質粒DNA中的抗性標志來篩選該細胞系，單克隆篩選穩(wěn)定細胞株。1、篩選濃度測定，以10~14天細胞全部死亡的抗生素濃度為篩選濃度；2、進行細胞接種，轉染實驗前天接種細胞，各種細胞的平板密度依據(jù)各種細胞的生長率和細胞形狀而定。進行轉染當天細胞密度應達到60...

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紫外可見分光光度計操作標準SOP

紫外可見分光光度計操作維護標準SOP1.0適用范圍：本規(guī)程適用于制藥行業(yè)質量控制實驗室安裝的紫外可見分光光度計操作維護和清潔標準2.0職責：QC員：負責儀器的操作和維護。QC負責人/經(jīng)理：負責儀器操作標準程序的問責制和有效實施。3.0定義-分光光度計：測量樣品在固定波長或較寬波長掃描范圍內的吸光度，并在單色光束通過樣品時產生光譜的裝置。4.0紫外可見分光光度計操作步驟：4.1操作前確保儀器清潔并校準。打開儀器和與儀器連接的計算機的主電源。4.3接通電源后，分光光度計開始初始化...

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塑料離心管和玻璃離心管選購指南

市場上常見離心管主要分為兩種：即：塑料離心管和玻璃離心管，也有少數(shù)是鋼制離心管。那么這些不同材質的離心管有什么區(qū)別呢?下面小編就來介紹一下塑料離心管和玻璃離心管的區(qū)別。玻璃離心管玻璃離心管是由玻璃制成的，不同廠家可能使用的玻璃成分不同，所以強度上可能會略有差異。我們的普通玻璃試管可以承受的相對離心力(RCF)通常小于3000g，而硼硅玻璃管一般可以承受超過10000g以上的相對離心力。但由于玻璃離心管質量易碎，所以玻璃管一般不用于高速離心機，用得也不多。由于玻璃本身的特性，它...

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