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細胞凋亡實驗步驟及注意事項

一、實驗目的1、掌屋凋亡細胞的形態(tài)特征2、學會用熒光探針對細胞進行雙標記來檢測正常活細胞、凋亡細胞和壞死細胞的方法二、實驗原理細胞死亡根據(jù)其性質、起源及生物學意義區(qū)分為凋亡和壞死兩種不同類型。凋亡普遍存在于生命界，在生物個體和生存中起著非常重要的作用。它是細胞在一定生理條件下一系列順序發(fā)生事件的組合，是細胞遵循一定規(guī)律自己結束生命的自主控制過程。細胞凋亡具有可鑒別的形態(tài)學和生物化學特征。在形態(tài)上可見凋亡細胞與周圍細胞脫離接觸，細胞變園，細胞膜向內(nèi)皺縮、胞漿濃縮、內(nèi)質網(wǎng)擴張、細...

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科研實驗常用人肝癌細胞株的區(qū)別

肝細胞癌（hepatocellularcarcinoma，HCC）是近年來發(fā)病率急劇上升的惡性腫瘤之一。肝癌細胞系廣泛應用于各類肝癌的研究。肝癌細胞系的基因組與健康人細胞系的基因組不同。常見的人肝癌細胞系有PLC、Huh7、Huh7.5、Hep3B、HepG2、SMMC-7721、MHCC97-H、MHCC9-L等，每一種細胞系都有自己的特點，但是，SMMC-7721,、MHCC9-L已經(jīng)退出實驗舞臺，由于它們具有與原代肝癌細胞相似的生物學特性，無生物學改變、特性穩(wěn)定、無限制...

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慢病毒包裝常見問題匯總

Q:什么是MOI？A:在微生物學中，MOI是病原體(如噬菌體或病毒、細菌等)與感染目標(如細胞)的比率。對于病毒，MOI是病毒顆粒數(shù)量與特定空間中存在的目標細胞數(shù)量的比率。通?？蓪⒛持昙毎?0%被感染時所用的病毒顆粒數(shù)和細胞數(shù)目的比值作為該株細胞的MOI。Q：如何稀釋病毒？A：您可使用完培、PBS液等將病毒稀釋到需要的滴度。如將滴度為5x109TU/ml的病毒稀釋到1x109TU/ml，則需取20µl病毒液加入到80µl的完培中。Q：用于病毒感染的細...

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慢病毒包裝步驟

1.重組慢病毒的制備Day1:匯合度90%的10cmdishsHEK293T細胞（~6×107/dish）按1：1比例傳代至15cmdishs，第二天細胞匯合度達到90%-95%（~1.5×108/dish），培養(yǎng)基為Gibico高糖DMEM培養(yǎng)基（含10%FBS）。Day2:轉染前2-3個小時更換培養(yǎng)基（含10%FBS)；2)按照以下比例配制轉染試劑：Mix1體積μlMix2量DMEM（無FBS）1000μlDMEM（無FBS）1000μl目的基因質粒25μgVGF190μ...

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病毒實驗原理和慢病毒包裝系統(tǒng)介紹

慢病毒是一種有包膜的RNA病毒，直徑為80-120nm，呈二十面體對稱結構、球形。病毒顆粒最外層是包膜(包膜蛋白決定了感染細胞的類型)，再往里依次為基質蛋白和衣殼，最里面是兩條相同的正股RNA鏈和酶(逆轉錄酶、整合酶和蛋白酶)。慢病毒實驗原理慢病毒（Lentivirus）是逆轉錄病毒的一種，基因組為雙鏈RNA。但區(qū)別于一般的逆轉錄病毒，慢病毒具有更廣的宿主范圍，對分裂細胞和非分裂細胞均具有感染能力。重組慢病毒載體是以HIV-1（人類免疫缺陷I型病毒）為基礎發(fā)展起來的工具載體，...

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